爱情岛论坛亚洲品质自拍-国产精品一级无遮挡毛片-97在线观看永久免费视频-久久久久久国产精品mv-久久88-欧美久久精品-精品国产123-性色欲情网站iwww九文堂-欧美色综合网站-日韩视频在线观看一区二区三区-免费乱码人妻系列无码专区-中年人妻丰满av无码久久不卡-avhd101高清在线迷片麻豆-咪咪色影院-国模小黎大尺度精品(02)[82p]-少妇真实被内射视频三四区-国产精品久久久久久一区二区三区-国产真人性做爰久久网站-国产视频首页-日韩亚洲欧美在线

技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > ELISA實驗操作要點:固體樣本處理方法

ELISA實驗操作要點:固體樣本處理方法

更新時間:2022-04-27   點擊次數:1626次

 固體樣本處理方法:
    固體樣本處理原則:稱取1g的固體樣本,用9g的合適緩沖液溶解,分泌蛋白可以直接離心取上清檢測,細胞內的蛋白,要先收集細胞,再用合適方法破碎,離心取上清測試。
1、組織標本:切割標本后,稱取1g組織,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清。分裝一份待檢測,其余冷凍備用,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。對于植物組織,不好勻漿的話,就用液氮研磨,將植物組織放在研缽中,加入適量液氮,充分研磨。
2、細胞內蛋白樣本:
許多待測蛋白不是分泌蛋白,而是存在于細胞內的蛋白,這個時候,要先收集細胞,洗滌干凈,再破碎細胞,離心取上清。
(1)培養的細胞
A、動物細胞:用PH7.2-7.4的PBS稀釋細胞懸液,使細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融(如果反復凍融,破碎效果不好,就采用超聲波破碎),以使細胞破壞并放出細胞內成份。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
B、植物細胞:用PH7.2-7.4的PBS稀釋細胞懸液,使細胞濃度達到100萬/ml左右,置于冰盒上,用超聲破碎儀,設置破碎2s,冷卻30s的方式,充分破碎細胞,以使細胞破壞并放出細胞內成份。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)組織的細胞
切割標本后,稱取1g組織,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或勻漿器將標本勻漿充分。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗滌沉淀的細胞三遍。再用上述的細胞破碎方法破碎細胞。
3、土壤:稱取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工將標本充分混勻。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清。分裝一份待檢測,其余冷凍備用,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。如果是測分泌蛋白,直接取上清檢測,測試細胞內蛋白,要破碎細胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS,溶解咽拭子頭部,搖勻,用鑷子取出咽拭子并擠干液體,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清。分裝一份待檢測,其余冷凍備用,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。如果是測分泌蛋白,直接取上清檢測,測試細胞內蛋白,要破碎細胞。
5. 植物標本的采集及保存 :
(1) 稱取0.1g(誤差±3%以內)新鮮植物組織樣本,在液氮中充分研磨;
(2)加入1ml的提取液(80%甲醇), 置于-20度過一夜;
(3) 于4度,8000rpm,離心1小時,取上清;
(4) 上清液過C-18固相萃取柱。具體步驟是: 80%甲醇(1ml)平衡柱→上樣→收集樣品→移開樣品后用*甲醇(5ml)洗柱→*(5ml)洗柱→*甲醇(5ml)洗柱→循環。過柱后的樣本真空干燥或氮氣吹干,保存備用;
(5)上樣前加入pH7.4 PBS緩沖液(1ml定容)。混勻后室溫放置30分鐘,然后4度離心(8000rpm,15分鐘),取上清并暫時保存于4度待用。
樣本收集注意事項:
1、不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2、標本采集后盡快進行實驗,若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
3、我們羅列的是通用的樣本處理方法,無法涵蓋各種樣本,對于一些特殊樣本,建議實驗人員多參考已發表的文獻,自行設計合理的樣本處理方法。

  注:凡購買我司BIM試劑盒的客戶,均贈送高附加值的技術咨詢服務,讓您的科研健步如飛!




主站蜘蛛池模板: 无码精品毛片波多野结衣 | 你懂的网址在线观看 | 国产成人精品一区二区三区无码 | 国产浮力影院 | 亚洲第一成人av | 男女做爰猛烈叫床视频动态图 | 国产粉嫩尤物极品99综合精品 | 国产在线一区二区香蕉 在线 | 国产精品乡下勾搭老头1 | 久久久久久精品色费色费s 国产+日韩+另类+视频一区 | 1区2区3区4区产品不卡码网站 | 国产成本人片无码免费 | 国产精品推荐手机在线 | 亚洲精品粉嫩美女一区 | 国产精品无码一区二区三区电影 | 国产精品69午夜妇大片 | 国产精品乱码高清在线观看 | 俺去俺来也在线www色官 | 精品久久久久久无码国产 | 污污内射久久一区二区欧美日韩 | 九九九精品成人免费视频 | 国产99久久亚洲综合精品 | 日韩精品一区二区三区老鸭窝 | 欧美大白屁股 | 无码网站天天爽免费看视频 | 性猛交ⅹxxx富婆视频 | 日韩中文字幕亚洲 | 久久国产偷任你爽任你 | 精品系列无码一区二区三区 | 又黄又硬又湿又刺激视频免费 | 国产在线98福利播放视频 | 三级视频在线 | 日韩精品一区二区三区在线播放 | 免费av手机在线观看 | 懂色av懂色aⅴ精彩av | 四虎影视永久在线观看 | 国产三级一区 | 亚洲精品污一区二区三区 | 国产免费永久精品无码 | 粗了大了 整进去好爽视频 国模妙妙超大尺度啪啪人体 | 中日韩精品卡一卡二卡3卡 亚洲码国产精品高潮在线 www.久操 | 久久av无码αv高潮αv喷吹 | 99国产精品丝袜久久久久久 | 亚洲视频免费在线播放 | 丰满少妇高潮惨叫久久久 | 亚洲人成网站在线播放2020 | 性综合网| 交视频在线播放 | 免费麻豆视频 | 欧美一级a俄罗斯毛片 | 屁屁国产第一页草草影院 | 成人免费播放 | 久久久久久蜜桃一区二区 | 精品夜夜爽欧美毛片视频 | 成a∨人片在线观看无码 | 2022av在线| 国产成人精品女人久久久 | 热99在线视频 | 欧美在线性 | 天天做天天爱天天做天天吃中 | 最近高清中文字幕免费 | 99热精品国自产拍天天拍 | 国产重口老太伦 | 欧美性一区二区 | 人妻互换精品一区二区 | 夜鲁夜鲁狠鲁天天在线 | 精品亚洲aⅴ在线无码播放 村上凉子在线播放av88 | 婷婷五月综合丁香在线 | 国产成人亚洲精品无码av大片 | 中文乱码在线中文字幕中文乱码 | 亚洲欧美日韩国产精品 | 91精品欧美一区二区三区 | 欧美一区二区三区在线视频观看 | 激情久久五月 | 无码av一区二区三区无码 | 亚洲欧美日韩另类丝袜一区 | 两根大肉大捧一进一出好爽视频 | 国精产品一区一区三区视频 | 久久精品成人免费观看97 | 99久久免费只有精品国产 | 天天干天天射天天操 | 91精产品一区一区三区40p | 国语自产偷拍精品视频偷 | 日韩三级精品 | 欧美日韩亚洲国产欧美电影 | 欧美日韩精品无码一本二本三本色 | 国产黄色片免费看 | 久久国产精品福利一区二区三区 | 免费人成无码大片在线观看 | 亚洲一区二区三区丝袜 | 勾搭足浴女技师国产在线 | 日韩欧美国产成人 | 成年人在线观看av | 91精品国产色综合久久久蜜香臀 | 男女插孔视频 | 久久avav| 色视频综合无码一区二区三区 | 亚洲国产三级 | 性高潮免费视频 |